PCR500L東莞KIKUSUI /菊水PCR500L*電子副負(fù)載儀廠家
宏鑫電子儀器有限公司
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產(chǎn)品名稱：可編程變頻電源
產(chǎn)品品牌：KIKUSUI /菊水
產(chǎn)品型號(hào)：PCR500L
菊水PCR500L變頻電源 新款熒光顯示供應(yīng)二手日本菊水PCR500L變頻電源 新款熒光顯示型號(hào)PCR500L 500W變頻電源(日本菊水新款)
輸出電壓范圍：0到100和2到300
輸出功率：50
最大電流：5@100@200伏和軟件
輸出頻率范圍：1至999.9赫茲。
輸入：85到132伏交流電和170到250伏交流電，47至63赫茲
尺寸：8.5“×16.9”×21.7“（217×430×550（毫米）
重量：30KG
多功能交流穩(wěn)壓電源（菊水）KIKUSUI PCR1000L類別：變頻電源FREQUENCY CONVERTER品牌：KIKUSUI ELECTRONICS （菊水）型號(hào)：PCR1000L［1000W變頻電源（日本菊水新款）］產(chǎn)品規(guī)格：W455＊D595＊H415mm，約49kg原產(chǎn)地：日本◆功能：√；诟咚倬性放大器的高品位、高穩(wěn)定和寬量程的輸出√。具備各類計(jì)測(cè)功能（電壓•電流的有效值•峰值、功率、有功功率、高次諧波電流簡(jiǎn)易測(cè)定）√。不僅可以輸出AC，而且還可輸出DC，甚至是AC＋DC混合模式√。豐富的電源異常仿真功能√。柔性擴(kuò)展性強(qiáng)，可望應(yīng)用于電源環(huán)境測(cè)試和各類抗擾度試驗(yàn)、功率放大任意信號(hào)發(fā)生器的輸出波形√。通過組合輸出擴(kuò)展套件還可以輕而易舉地構(gòu)建單相／單相3線或單相／三相切換系統(tǒng)。◆基本功能：高品位精確輸出／兼交流、直流的輸出／可調(diào)電壓輸出／可調(diào)頻率輸出／可調(diào)阻抗輸出／峰值設(shè)定／適用多種輸入／限值設(shè)定功能／保護(hù)功能／記憶功能／鎖定功能／同步功能／自檢功能◆擴(kuò)展功能：產(chǎn)線模擬功能／特定波形輸出／自定義波形輸出／時(shí)序功能／相位差設(shè)定／諧波電流分析／阻抗輸出設(shè)定／電源因素峰值測(cè)定／交流直流混合模式／擴(kuò)展記憶功能／傳感功能◆特點(diǎn)：電源異常仿真功能 測(cè)量瞬時(shí)壓降 測(cè)量諧波電流 諧波分析 彩色熒光顯示 進(jìn)風(fēng)散熱 兼交流、直流、混合模式輸出 自檢功能 限值設(shè)定功能 保護(hù)功能 記憶功能 ◆應(yīng)用：√。電源環(huán)境測(cè)試√。諧波電源測(cè)試√。產(chǎn)線自動(dòng)測(cè)試√。全球通用電源√。電磁干擾測(cè)試
同時(shí)有菊水變頻電源2KW、5KW、10KW
大鼠可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體（sEPCR）ELISA檢測(cè)試劑盒
聯(lián)系電話：135 6451 5386 QQ： 1161399267 余先生
檢測(cè)方法： ELISA酶聯(lián)免疫法
說 明 書：隨貨發(fā)送，也可直接聯(lián)系在線銷售索取
測(cè)試種屬：人、大小鼠、豚鼠、兔子、牛、羊、豬、雞、鴨elisa試劑盒等種屬
檢測(cè)目的：用于測(cè)定血清，血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測(cè)包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本。
試劑盒保存及有效期：2-8℃,避光保存:6個(gè)月。
產(chǎn)品產(chǎn)地：進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)
產(chǎn)品庫存：
品牌：自主研發(fā)/進(jìn)口原裝
產(chǎn)品價(jià)格：價(jià)格優(yōu)惠，歡迎來電洽談！
試劑盒使用范圍：僅供科研檢測(cè),不得用于臨床.
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ELISA試劑盒定性定量檢測(cè)一步到位，可同時(shí)大批量完成多種屬的檢測(cè)工作，而且一天之內(nèi)可以檢查幾百甚至上千份標(biāo)本，正規(guī)專業(yè)的我們，一定能幫您，將實(shí)驗(yàn)做得更好，更精確。試驗(yàn)過程中，如有任何疑問都可和我們聯(lián)系，無論是售前、售中、售后我們都將始終如一，將優(yōu)質(zhì)服務(wù)進(jìn)行到底。
本試劑盒僅供研究使用。
試劑盒組成
| 1 | 20倍濃縮洗滌液 | 50ml×1瓶 |
9 | 標(biāo)準(zhǔn)品S1（6 IU/L） | 0.5ml×1瓶 |
| 2 | 鏈霉親和素-HRP | 6ml×1瓶 | 標(biāo)準(zhǔn)品S2（4 IU/L） | 0.5ml×1瓶 | |
| 3 | 酶標(biāo)包被板 | 12孔×8條 | 標(biāo)準(zhǔn)品S3（2 IU/L） | 0.5ml×1瓶 | |
| 4 | 生物素標(biāo)記的抗-IgG抗體 | 6ml×1瓶 | 標(biāo)準(zhǔn)品S4（1IU/L） | 0.5ml×1瓶 | |
| 5 | 顯色劑A液 | 6ml×1瓶 | 標(biāo)準(zhǔn)品S5（0.5 IU/L） | 0.5ml×1瓶 | |
| 6 | 顯色劑B液 | 6ml×1/瓶 | 10 | 密封袋 | 1個(gè) |
| 7 | 終止液 | 6ml×1瓶 | 11 | 封板膜 | 3張 |
| 8 | 樣品稀釋液 | 6ml×1瓶 | 12 | 說明書 | 1份 |
標(biāo)本要求
1．不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
2．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
操作步驟
1. 根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。
2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測(cè)樣品孔。然后在標(biāo)準(zhǔn)品孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品50μl，在樣本反應(yīng)孔中先加入待測(cè)樣品10μl再加入樣品稀釋液40μl（樣品最終稀釋度為5倍），蓋上封板膜，輕輕振蕩混勻，37℃溫育45分鐘。
3. 配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用
4. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)4次，拍干。
5. 加生物素標(biāo)記的抗-IgG抗體：每孔加入生物素標(biāo)記的抗-IgG抗體50μl。37℃溫育30分鐘
6. 洗滌：操作同4。
7. 加鏈霉親和素-HRP：每孔加入50μl的鏈酶親和素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。
8. 洗滌：操作同4。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A 50μl，再加入顯色劑B 50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
計(jì)算
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值待入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。
注意事項(xiàng)
1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2．濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間最好控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
4． 如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第一孔的OD值），請(qǐng)先將樣本稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)最后乘以稀釋倍數(shù)（×5×n）。
5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．本試劑不同批號(hào)組分不得混用。顯色劑B請(qǐng)避光保存。
7．嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準(zhǔn)。
檢測(cè)范圍：0.312 mU/ml-20 mU/ml
靈敏度：0.078 mU/ml
規(guī)格：
96人份/盒
保存條件及有效期
1．試劑盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6個(gè)月
關(guān)于ELISA試劑盒
ELISA試劑盒在國(guó)內(nèi)有許多種叫法，例如：ELISA檢測(cè)試劑盒、ELISA Kit、酶聯(lián)免疫試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒、酶聯(lián)免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等，比較常見的叫法是ELISA檢測(cè)試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒等。
ELISA試劑盒自從60-70年代問世以來，得到全世界科研工作者的認(rèn)可及推崇，在歐美及中國(guó)獲得很大的推廣，尤其是國(guó)內(nèi)生化領(lǐng)域的長(zhǎng)足發(fā)展。
Elisa生物試驗(yàn)是一種敏感性高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡(jiǎn)便，結(jié)果判斷較客觀等因素，已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中。ELISA檢測(cè)試劑盒適用于體外定性檢測(cè)人血清或血漿中的抗人類戊型肝炎（HEV）病毒 IgM 抗體ELISA檢測(cè)。
免疫測(cè)定技術(shù)的基礎(chǔ)在于抗原抗體之間的特異結(jié)合反應(yīng)，所以任何優(yōu)質(zhì)的診斷試劑離不開優(yōu)質(zhì)的原料，如抗原抗體，酶等。以前用于免疫測(cè)定的抗原通常為各種純化抗原，而抗體則為純化抗原免疫動(dòng)物后獲得的多克隆抗體和使用雜交瘤技術(shù)得到的單克隆抗體，而抗原或抗體的標(biāo)記物如酶標(biāo)結(jié)合物則通過各種化學(xué)合成方法制備。近年來，隨著分子生物學(xué)的發(fā)展，使用基因工程方法制備各種特殊的抗原或抗體及其酶結(jié)合物等免疫測(cè)定試劑幾成為現(xiàn)實(shí)的新一代試劑，各種新型使用的測(cè)定方法也不斷出現(xiàn)。
HBsAg試劑特點(diǎn)（檢測(cè)模式：臨床抗體夾心法）：包被抗體為山羊多抗。多抗具有高親和性和對(duì)抗原各種表位的反應(yīng)性。酶表抗體為與HBsAg有不同結(jié)合位點(diǎn)的鼠復(fù)合單位，可測(cè)得HBsAg變異樣品，提高檢測(cè)的特異性（99.98%）提高檢測(cè)的靈敏度，應(yīng)用Parl Ehrich 學(xué)說（PEI）HBsAg標(biāo)準(zhǔn)品，對(duì)ad標(biāo)準(zhǔn)品的靈敏度為0.05ng/ml對(duì)ay標(biāo)準(zhǔn)品靈敏度為0.025ng/ml
ELISA檢測(cè)試劑盒應(yīng)用定性夾心免疫檢測(cè)技術(shù)，用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板條，這些多肽是中國(guó)型HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很強(qiáng)的肽段，分別來自于該毒株的開放閱讀框2和開放閱讀框3。將樣品或標(biāo)準(zhǔn)品加入孔中并孵育，如果其中存在HEV IgM抗體，這些抗體就會(huì)與HEV 的多肽抗原結(jié)合，并固定在上面，洗板除去其它非特異性抗體和樣品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP（辣根過氧化物酶）酶結(jié)合物，經(jīng)第二次孵育后，酶結(jié)合物就會(huì)與第一次孵育結(jié)合上的HEV IgM抗體相結(jié)合，洗板除去未結(jié)合的酶結(jié)合物，加入TMB底物溶液，在第三次孵育時(shí)會(huì)發(fā)生酶-底物反應(yīng)，只有那些含有HEV IgM抗體和酶結(jié)合物所形成的復(fù)合物的孔才會(huì)發(fā)生顏色變化，加入硫酸溶液終止酶和底物間的反應(yīng)，并在波長(zhǎng): 450nm處測(cè)量O.D.值,按照本HEV IgM抗體elisa試劑盒的測(cè)試標(biāo)準(zhǔn), O.D.值大于或等于Cut-Off值的樣品被認(rèn)為是初試陽性。
LISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性，酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí)，受檢標(biāo)本（測(cè)定其中的抗體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體，也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果，使測(cè)定方法達(dá)到很高的敏感度。 ELISA可用于測(cè)定抗原，也可用于測(cè)定抗體。
然而，影響Elisa試驗(yàn)結(jié)果的因素很多，故加強(qiáng)各個(gè)環(huán)節(jié)的質(zhì)量保證才能充分發(fā)揮其方法學(xué)的優(yōu)點(diǎn)。
特點(diǎn)：一、高效、靈敏、特異的抗體； 二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性； 三、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體； 四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型； 五、節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。
elisa試劑盒回收率是反應(yīng)待測(cè)物在樣品分析過程中的損失的程度，損失越少，回收率越高，如果作標(biāo)液1PPM，就是1毫克/升，而作出標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)為0.99毫克/升，就是說你的回收率是99%，這個(gè)與真實(shí)成分有密切的關(guān)系，說明方法的準(zhǔn)確度。比如水中總無機(jī)氯含量測(cè)定，樣品水中含有無機(jī)氯20mg/L，取100mL被測(cè)水樣品，加入0.1mL濃度為10mg/mL的含無機(jī)氯標(biāo)準(zhǔn)樣品，測(cè)定時(shí)忽略體積變化，如果測(cè)定出樣品中無機(jī)氯為2.98mg/L，則認(rèn)為回收率為99%。
安全性
1． 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請(qǐng)盡快用水沖洗。
2． 實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3． 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
4． 試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
5． 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
6． 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
7． 使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器。
8． 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
9． 洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
10． 底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
11． 加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
12． 按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
elisa試劑盒測(cè)試要求
做好對(duì)照
正式試驗(yàn)時(shí)，應(yīng)分別以陽性對(duì)照與陰性對(duì)照控制試驗(yàn)條件，待檢樣品應(yīng)作一式二份，以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時(shí)本底較高，說明有非特異性反應(yīng)，可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
實(shí)驗(yàn)條件的選擇
在ELISA中，進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的，其中包括:
（1） 固相載體的選擇：許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體，在使用前均可進(jìn)行篩選：用等量抗原包被，在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng)，觀察其顯色反應(yīng)是否均一性，據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
（2） 包被抗體（或抗原）的選擇：將抗體（或抗原）吸附在固相載體表面時(shí)，要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0～9.6之間。吸附溫度，時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃ 18～24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的最適濃度需進(jìn)行滴定：即用不同的蛋白質(zhì)濃度（0.1、1.0和10μg/ml等）進(jìn)行包被后，在其它試驗(yàn)條件相同時(shí)，觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD值最大而蛋白量最少的濃度。對(duì)于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1～10μg/ml。
（3） 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定（見酶標(biāo)記抗體部份）。然后再固定其它條件或采取“方陣法”（包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度）在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
（4） 酶的底物及供氫體的選擇：對(duì)供氫體的選擇要求是價(jià)廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng)，而本身無色。有些供氫體（如OPD等）有潛在的致癌作用，應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體，如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時(shí)間后，應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時(shí)間，以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制，尤其是H2O2在臨用前加入。
檢測(cè)范圍和靈敏度不同，用量少時(shí)，可使用分裝，前期是它的長(zhǎng)久性不是很好。
試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)曲線最高點(diǎn)OD 值均在2.0±0.2，零孔的OD 值都控制在0.10以下。
試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)R≥0.98。
試劑盒重復(fù)性好，板內(nèi)、板間變異系數(shù)均<9 %。
試劑的組份都多給20%的富余量，確保完成48/96孔的檢測(cè)，避免分次檢測(cè)可能造成試劑量不足的情況。
檢測(cè)抗體及酶結(jié)合物的稀釋度合適(均為1:30), 方便試驗(yàn)操作者準(zhǔn)確地做稀釋工作，保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的重復(fù)性
ELISA法是免疫診斷中的一項(xiàng)新技術(shù)，現(xiàn)已成功地應(yīng)用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應(yīng)用于大分子抗原和小分子抗原的定量測(cè)定，根據(jù)已經(jīng)使用的結(jié)果，認(rèn)為ELISA法具有靈敏、特異、簡(jiǎn)單、快速、穩(wěn)定及易于自動(dòng)化操作等特點(diǎn)。不僅適用于臨床標(biāo)本的檢查，而且由于一天之內(nèi)可以檢查幾百甚至上千份標(biāo)本,因此，也適合于血清流行病學(xué)調(diào)查。本法不僅可以用來測(cè)定抗體，而且也可用于測(cè)定體液中的循環(huán)抗原，所以也是一種早期診斷的良好方法。因此ELISA法在生物醫(yī)學(xué)各領(lǐng)域的應(yīng)用范圍日益擴(kuò)大
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人可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)elisa試劑盒
人可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)elisa試劑盒參數(shù)：
| 編號(hào) | 中文名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 |
| F2637-A | 人可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)elisa試劑盒 | Human soluble endothelial protein C receptor,sEPCR elisa Kit | 48T |
人可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)elisa試劑盒技術(shù)流程ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性，酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí)，受檢標(biāo)本（測(cè)定其中的抗體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體，也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果，使測(cè)定方法達(dá)到很高的敏感度。 ELISA可用于測(cè)定抗原，也可用于測(cè)定抗體。然而，影響Elisa試驗(yàn)結(jié)果的因素很多，故加強(qiáng)各個(gè)環(huán)節(jié)的質(zhì)量保證才能充分發(fā)揮其方法學(xué)的優(yōu)點(diǎn)。
主要優(yōu)點(diǎn)1、簡(jiǎn)易操作、高效、靈敏、特異的抗體；2、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性；3、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體；4、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型；5、節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。
使用方法1、 血清：操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血紅細(xì)胞迅速小心地分離。2、 血漿：EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、 細(xì)胞上清液：1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液。5、 保存：如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測(cè)前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。操作步驟1：雙抗體夾心法1.包被：用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1～10μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃ 過夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。（簡(jiǎn)稱洗滌，下同）。2. 加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃ 孵育1小時(shí)。然后洗滌。（同時(shí)做空白孔，陰性對(duì)照孔及陽性對(duì)照孔）。3. 加酶標(biāo)抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體（經(jīng)滴定后的稀釋度）0.1ml。37℃ 孵育0.5～1小時(shí)，洗滌。4. 加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。5. 終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。6. 結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值：在ELISA檢測(cè)儀上，于450nm（若以ABTS顯色，則410nm）處，以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍，即為陽性。操作步驟2：間接法1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg/ml，每孔加0.1ml，4℃過夜；2.次日洗滌3次；3.加一定稀釋的待檢樣品（未知抗體）0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌；4.（同時(shí)做空白、陰性及陽性孔對(duì)照）于反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體（抗抗體）0.1ml；5.37℃孵育30-60分鐘，洗滌；6.’最后一遍用DDW洗滌。其余步驟同“雙抗體夾心法”的4、5、6。
標(biāo)本要求1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融2．不能檢測(cè)含NaN3 的樣品，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
應(yīng)用信息ELISA法是免疫診斷中的一項(xiàng)新技術(shù)，現(xiàn)已成功地應(yīng)用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應(yīng)用于大分子抗原和小分子抗原的定量測(cè)定，根據(jù)已經(jīng)使用的結(jié)果，認(rèn)為ELISA法具有靈敏、特異、簡(jiǎn)單、快速、穩(wěn)定及易于自動(dòng)化操作等特點(diǎn)。不僅適用于臨床標(biāo)本的檢查，而且由于一天之內(nèi)可以檢查幾百甚至上千份標(biāo)本,因此，也適合于血清流行病學(xué)調(diào)查。本法不僅可以用來測(cè)定抗體，而且也可用于測(cè)定體液中的循環(huán)抗原，所以也是一種早期診斷的良好方法。因此ELISA法在生物醫(yī)學(xué)各領(lǐng)域的應(yīng)用范圍日益擴(kuò)大，可概括四個(gè)方面：1、免疫酶染色各種細(xì)胞內(nèi)成份的定位。2、研究抗酶抗體的合成。3、顯現(xiàn)微量的免疫沉淀反應(yīng)。4、定量檢測(cè)體液中抗原或抗體成份。編輯本段進(jìn)口分裝進(jìn)口分裝：檢測(cè)范圍和靈敏度不同，用量少時(shí)，可使用分裝，前期是它的長(zhǎng)久性不是很好。試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)曲線最高點(diǎn)OD 值均在2.0±0.2，零孔的OD 值都控制在0.10以下。試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)R≥0.99。試劑盒重復(fù)性好，板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于9 %。試劑的組份都多給20%的富余量，確保完成48/96孔的檢測(cè)，避免分次檢測(cè)可能造成試劑量不足的情況。檢測(cè)抗體及酶結(jié)合物的稀釋度合適(均為1:30), 方便試驗(yàn)操作者準(zhǔn)確地做稀釋工作，保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的重復(fù)性。白介素6是一種細(xì)胞因子,已被證實(shí)為B細(xì)胞分化因子.它是一種抗體形成系統(tǒng),它的生理特性,如肝細(xì)胞急性蛋白合成的誘導(dǎo)和基于和白介素3協(xié)同作用的生長(zhǎng)刺激等,也備受關(guān)注. 并且已證實(shí)白介素-6與病理學(xué)存在穩(wěn)定的相關(guān)關(guān)系.例如,報(bào)道多種疾病的生長(zhǎng)因子為白介素-6, 骨髓瘤細(xì)胞能合成白介素-6并表達(dá)白介素-6受體.此外, 白介素6在多種炎性疾病和自身免疫疾病發(fā)揮重要的作用. 此試劑盒能高靈敏度的檢測(cè)小鼠血清和細(xì)胞基質(zhì)上清的白介素6 原理 此試劑盒運(yùn)用了兩種特異性抗體,洗板后加入TMB底物液顯色,顯色的強(qiáng)度與小鼠的白介素-6的量成正比. 檢測(cè)范圍 10.94 700 pg/mL [2]預(yù)期用途此IBL試劑盒能用于小鼠血清,EDTA血漿,細(xì)胞上清中白介素-6的定量檢測(cè)試劑盒成分1 預(yù)包被板: 抗小鼠白介素-6兔子IgG,親合純化 96T2 酶標(biāo)記抗體: (30倍濃縮)HRP標(biāo)記抗小鼠白介素-6兔子IgG,親合純化 0.4mL x 13 標(biāo)準(zhǔn)品: 重組小鼠白介素-6 0.5mL x 2 4 EIA緩沖液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 30mL x 15 標(biāo)記抗體稀釋液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 12mL x 16 顯色劑: TMB底物液 15mL x 17 終止液: 1N硫酸 12mL x 18 濃縮洗滌液: (40倍濃縮) 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 50mL x 1 操作說明 1實(shí)驗(yàn)所需器材(但試劑盒沒有提供) 酶標(biāo)儀(450nm) 微移液管及其吸嘴 量筒及燒杯 去離子水 冰箱(4°C) 坐標(biāo)紙(log/log) 吸水紙 試管(用于標(biāo)準(zhǔn)品稀釋) 溫育箱(37°C ± 1°C) 洗瓶 (用于洗板) 一次性試劑管(用于濃縮酶標(biāo)記抗體和顯色劑)[3]
注意事項(xiàng)1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2．濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間最好控制在5 分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。4． 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，最好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高（樣本OD 值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第一孔的OD 值），請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n 倍）后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)最后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物請(qǐng)避光保存。7．嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9．本試劑不同批號(hào)組分不得混用。10.保存條件及有效期：1．試劑盒保存：；2-8℃。2．有效期：6 個(gè)月
熒光定量PCR
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熒光定量PCR檢測(cè)技術(shù)從誕生到現(xiàn)在已經(jīng)有 8 年了，但是其應(yīng)用在近四年才迅猛增長(zhǎng)。在Medline 數(shù)據(jù)庫中，用“ Taqman” 或 ”real time PCR”作為關(guān)鍵詞檢索，在1996年僅有19篇，在1997年僅有28篇，在98 、 99 、2000 年分別達(dá)到了52 、157 、409篇， 2003年已經(jīng)達(dá)到2984篇，相信在不久的將來會(huì)有更多的文章發(fā)表。針對(duì)實(shí)時(shí) PCR 這一熱點(diǎn)領(lǐng)域，閃晶公司對(duì)它進(jìn)行了深入細(xì)致的研究，并且及時(shí)地為廣大科研人員推出這項(xiàng)技術(shù)服務(wù)。
熒光定量PCR基本原理 • Taqman 技術(shù)：該技術(shù)以美國(guó) ABI 公司為代表。 PCR 擴(kuò)增時(shí)，在加入一對(duì)引物的同時(shí)加入一個(gè)特異性的熒光探針。該探針為一直線型的寡核苷酸，兩端分別標(biāo)記一個(gè)熒光報(bào)告基團(tuán)和一個(gè)熒光淬滅基團(tuán)，探針完整時(shí)，報(bào)告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號(hào)被淬滅基團(tuán)吸收， PCR 儀檢測(cè)不到熒光信號(hào)； PCR 擴(kuò)增時(shí)（在延伸階段）， Taq 酶的 5＇ － 3＇ 外切酶活性將探針酶切降解，使報(bào)告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離，從而熒光監(jiān)測(cè)系統(tǒng)可接收到熒光信號(hào)，即每擴(kuò)增一條 DNA 鏈，就有一個(gè)熒光分子形成，實(shí)現(xiàn)了熒光信號(hào)的累積與 PCR 產(chǎn)物形成完全同步，這也是定量的基礎(chǔ)所在。
相關(guān)鏈接......ABI公司Taqman探針MGB探針Sybr green I染料ROX染料Taq酶（熒光定量PCR專用）熱啟動(dòng)酶熱啟動(dòng)熒光PCR定量核心試劑盒熒光定量PCR一步法RT－PCR試劑盒TrizolRNA提取試劑UNG酶標(biāo)準(zhǔn)品克隆定點(diǎn)突變亞克隆dUTP
• Beacon 技術(shù)：該技術(shù)以美國(guó)人 Tagyi 為代表。也是加入了熒光探針，但它是 環(huán)狀的寡核苷酸探針，分別由莖部和環(huán)部組成， 兩端分別標(biāo)記 熒光報(bào)告基團(tuán)和熒光猝滅基團(tuán)，在無靶序列的情況下，探針始終是環(huán)狀，報(bào)告基團(tuán)的熒光被猝滅基團(tuán)猝滅，使熒光檢測(cè)儀檢測(cè)不到熒光信號(hào)；而在有靶序列時(shí)，即在 PCR 的退火階段探針與靶序列結(jié)合，使熒光報(bào)告基團(tuán)和猝滅基團(tuán)分開，這樣熒光儀可以檢測(cè)到熒光，熒光信號(hào)的強(qiáng)弱代表了靶序列的多少。
相關(guān)鏈接......分子信標(biāo)知識(shí)介紹
• FRET 技術(shù)：該技術(shù)以 Roche( 羅氏公司 ) 為代表。它的基本原理是：兩條直線型寡核苷酸探針，其中一條的 3 ‘端標(biāo)記熒光激發(fā)基團(tuán)，另一條的 5 ＇ 端標(biāo)記熒光檢測(cè)基團(tuán)，在無靶序列的情況下，兩條探針分開，無法進(jìn)行能量的傳遞，這樣熒光儀不能檢測(cè)到熒光信號(hào)；而當(dāng)有靶序列時(shí)，即在 PCR 的退火階段兩條探針與靶序列結(jié)合，使得兩條探針上的熒光基團(tuán)可以進(jìn)行能量的傳遞，這樣熒光儀就可以檢測(cè)到熒光信號(hào)，熒光信號(hào)的強(qiáng)弱代表了靶序列的多少。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR中的幾個(gè)俗語 • Ct 值：是指每個(gè)反應(yīng)管內(nèi)的熒光信號(hào)到達(dá)設(shè)定的域值時(shí)所經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)。（如圖所示）
• 熒光域值（ threshold ）：是指 PCR 反應(yīng)的前 15 個(gè)循環(huán)的熒光信號(hào)，熒光域值的缺省設(shè)置是 3-15 個(gè)循環(huán)的熒光信號(hào)的標(biāo)準(zhǔn)偏差的 10 倍，即： threshold.• Ct 值與起始模板的關(guān)系：研究表明，每個(gè)模板的 Ct 值與該模板的起始拷貝數(shù)的對(duì)數(shù)存在線性關(guān)系〔 1 〕，起始拷貝數(shù)越多， Ct 值越小。利用已知起始拷貝數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)品可作出標(biāo)準(zhǔn)曲線，其中橫坐標(biāo)代表起始拷貝數(shù)的對(duì)數(shù)，縱坐標(biāo)代 Ct 值（如圖 2 所示）。因此，只要獲得未知樣品的 Ct 值，即可從標(biāo)準(zhǔn)曲線上計(jì)算出該樣品的起始拷貝數(shù)。
熒光定量PCR應(yīng)用廣泛 • 可以對(duì)各種基因的表達(dá)進(jìn)行定量分析，如：同一基因在不同組織中的表達(dá)差異、同一基因在不同藥物處理后的表達(dá)差異、轉(zhuǎn)基因食品的檢測(cè)。過去最常用的高通量篩選基因表達(dá)差異的技術(shù)是 cDNA 芯片和差異顯示，但這兩種技術(shù)的缺點(diǎn)是只能定性而非完整意義上的定量分析。實(shí)時(shí) PCR 技術(shù)和高通道實(shí)時(shí) PCR 儀的出現(xiàn)，無疑為這種檢測(cè)提供了極大的方便。 • 可以進(jìn)行點(diǎn)突變分析和等位基因分析，用不同的熒光報(bào)告基團(tuán)標(biāo)記 Taqman 探針，然后分別與野生型和突變型雜交，如果一種熒光信號(hào)明顯強(qiáng)于另一種熒光信號(hào)，則表明它是純合子；如果兩種熒光信號(hào)都明顯增強(qiáng)，則表明它是雜合子。另外分子信標(biāo)（ Molecular Beacon）就是專門為這種技術(shù)設(shè)計(jì)的探針。 • 可以進(jìn)行單核苷酸多態(tài)性的分析，檢測(cè)單核苷酸多態(tài)性對(duì)于研究個(gè)體對(duì)不同疾病的易感性或者個(gè)體對(duì)特定藥物的不同反應(yīng)有著重要的意義，因分子信標(biāo)結(jié)構(gòu)的巧妙性，一旦 SNP 的序列信息是已知的，采用這種技術(shù)進(jìn)行高通量的 SNP 檢測(cè)將會(huì)變得簡(jiǎn)單而準(zhǔn)確。 • 可以進(jìn)行 DNA 甲基化檢測(cè)， DNA 甲基化同人類的許多疾病有關(guān)，特別是癌癥， Laird 報(bào)道了一種稱作 Methylight 的技術(shù)，在擴(kuò)增之前先處理 DNA ，使得未甲基化的胞嘧啶變成尿嘧啶，而甲基化的胞嘧啶不受影響，用特異性的引物和 Taqman 探針來區(qū)分甲基化和非甲基化的 DNA ，這種方法不僅方便而且靈敏度更高。 • 對(duì)傳染性疾病進(jìn)行定量定性分析，這在我國(guó)應(yīng)用比較廣泛，大家比較熟悉。許多生產(chǎn)臨床PCR 試劑的廠商已經(jīng)陸續(xù)推出了一系列的診斷試劑，如：肝炎系列、性病系列、腫瘤系列等等。
• 閃晶生物同時(shí)提供藥物伴隨診斷(companion diagnostic)方法如EGFR、BRAF V600E突變、HER2 擴(kuò)增、BCR-Abl、PML-RAR、ALK融合基因等。
熒光定量PCR技術(shù)服務(wù) 
(含lncRNA熒光定量PCR-環(huán)狀RNA熒光定量PCR)熒光定量PCR用Taqman方法對(duì)DNA/RNA進(jìn)行real time PCR的定量測(cè)定或型的鑒定。
熒光定量PCR服務(wù)要求1. 請(qǐng)您提供新鮮的且盡量多的材料(各種材料的RNA提取量請(qǐng)參照“總RNA 的提取”），或直接提供純化好的總RNA（大于 5 ug/ 樣品）；（各種材料的DNA提取量請(qǐng)參照“ DNA的提取”），或直接提供純化好的DNA（大于 5 ug/ 樣品)。 2. 請(qǐng)通過E-mail提供已知的全長(zhǎng)基因序列。3. 請(qǐng)?zhí)峁┍M可能詳細(xì)的背景資料：DNA/ RNA來源、豐度等
熒光定量PCR操作程序 
1. 根據(jù)基因序列設(shè)計(jì)特異性的引物和熒光探針。 2. 提取DNA/RNA 。 3. Real Time PCR(熒光定量PCR)，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析 4. 實(shí)驗(yàn)完成后，提供完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告（含軟件分析結(jié)果）及引物等實(shí)驗(yàn)材料
熒光定量PCR收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn) 1、RNA提。10－20個(gè)樣品的RNA提取是：150元/個(gè)；20－30個(gè)樣品的RNA提取是：120 元/個(gè)；30個(gè)以上樣品的RNA提取是：100元/個(gè)；每份材料最少應(yīng)提供：100mg/樣品2、一個(gè)指標(biāo)每個(gè)樣品為150元；二個(gè)指標(biāo)每個(gè)樣品為240元；三指標(biāo)每個(gè)樣品為300元，三個(gè)指標(biāo)以上每個(gè)樣品為80元/反應(yīng)。3、引物合成為每個(gè)堿基2.1元，探針標(biāo)記為1200元/條，如果是用sybr green I(染料)做，則免去探針的費(fèi)用，染料贈(zèng)送。4、內(nèi)參的GAPDH引物探針免費(fèi)，標(biāo)準(zhǔn)曲線免費(fèi)贈(zèng)送。5、不再收取任何的基礎(chǔ)費(fèi)或者開機(jī)費(fèi)。
96T/48T人(sEPCR)kit,可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體Elisa試劑盒
人（sEPCR）kit,可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體Elisa試劑盒本試劑僅供研究使用 Elisa kit規(guī)格：48孔配置/96孔配置標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液：1.5ml×1瓶酶標(biāo)試劑：3 ml×1瓶（48）/6 ml×1瓶（96）
特異性：本試劑盒可同時(shí)檢測(cè)天然或重組的，且與其他相關(guān)蛋白無交叉反應(yīng)。有效期：6個(gè)月預(yù)期應(yīng)用：ELISA法定量測(cè)定血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清或其它相關(guān)生物液體中的含量。
人（sEPCR）kit,可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體Elisa試劑盒樣本處理及要求：1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。5. 組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
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PCR 基因倍增儀 核心控制板
8208支原體PCR檢測(cè)試劑盒
Mycoplasma, the smallest ａnd self-replicating prokaryotes, are common contaminant of primary ａnd continuous cell line cultures. It has been shown that micoplasma contamination affects cell growth, morphology ａnd metabolism. Because of their small size ａnd flexibility, mycoplasma can pass through commonly used filters of 0.2 μm. Furthermore, unlike bacterial ａnd fungi, micoplasma contamination is resistant to commonly used antibiotics, ａnd not easy to be spotted visually. These drawbacks emphasize the need for regular screening in control of mycoplasma contamination. Conventional screening methods include microbiological culture, fluorescent DNA staining ａnd biochemical detection methods. However, mycoplasma culture is restricted to specialized laboratories ａnd takes 2-4 weeks. Results of DNA fluorochrome staining are difficult to interpret due to the presence of broken nuclei. Various biochemical detections are time consuming ａnd often lack of sensitivity. Recently, polymerase chain reaction （PCR） based methods have been developed as a quick ａnd convenient detection of low level mycoplasma infection, which offers great advantage over the conventional methods because of its extreme sensitivity ａnd specificity. Computer alignment studies of mycoplasmal 16S rRNA sequences have revealed the existence of highly conserved sequences. Primers designed according to these sequences allow the specific amplification of mycoplasma DNA fragment ａnd thus highly sensitive detection of mycoplasma. ScienCell™ Mycoplasma PCR Detection Kit is a 16S rRNA-based PCR assay including 2X reaction buffer, primer set, as well as internal amplification control （IAC） ａnd positive sample control. The genus-specific primer set we ｓelect recognizes the five typical contaminating mycoplasma species （i.e. M. hyorhinis, M. arginini, M. orale, M. fermentans, ａnd A. laidlawi）, which account for 98% of contaminations, as well as members of the genera Ureaplasma, Spiroplasma, ａnd Acholeplasma, which account for the remaining 2% of contaminations. Eukaryotic ａnd bacterial DNA is not amplified by this kit. The IAC is designed to be co-amplified simultaneously with the target mycoplasma sequence by the same set of primers. The resulted control band, which is distinguished from the target band by a difference in molecular mass, indicates the occurrence of DNA amplification. Therefore, false negative results due to the presence of PCR inhibitors in some cell cultures can be identified. Our kit also provides a positive sample control, which is noninfectious genomic DNA （gDNA） of M. fermentans. On the other hand, a no template （i.e. DNA-free DI H2O） negative sample control can help to determine whether there is a false positive result due to carry-over contamination. Each experiment should include both positive ａnd negative sample controls, as well as the IAC.Product Use
This assay kit is used to detect mycoplasma in vitro. It is for research use only. Not for use in animals, humans, or diagnostic procedures.
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